紫外可见分光光度计的光度准确度测试方法, 目前国内外各生产厂家作法不一, 其主要原因是各国的国家标准不同; 如美国国家标准规定: “选择合适的标准参比材料, 在规定的波长处, 连续测10 个吸光度或透射比读数, 取10个读数的平均值, 实际吸光度或透射比与观测值的平均值之差, 即为光度准确度”

用于紫外可见分光光度计的光度准确度测试的材料, 应该是纯度高、稳定性好的物质。这些物质中最主要的是铬酸钾( K2 CrO4 , 一般在碱性溶液中)、重铬酸钾( K2 Cr2 O7 , 一般在酸性溶液中) 、硝酸钾、中性滤光片等。在碱性溶液中的铬酸钾是一种好材料, 但是因为含有碱性, 不能储藏在普通玻璃容器中, 而需要储藏在石英器皿中, 硝酸钾本身不大稳定。这些都限制了它们的使用。因此, 最好选择易于纯化又溶于酸性介质中的物质, 并且它们的稀溶液也是很稳定的。因此, 重铬酸钾的0. 005mol/ L H2 SO4 溶液经常被使用。

影响紫外可见分光光度计光度准确度的主要因素有以下几个方面。

　　① 仪器的杂散光大小。

　　② 仪器的光度噪声。

　　③ 仪器的基线平直度。

　　④ 仪器的光谱带宽。

　　⑤ 试样的来源, 包括样品的制备, 取样的方法。

　　⑥ 样品的制备, 包括称量、容量、溶剂、试剂、pH 值、时间、温度等。

　　⑦ 比色皿的性能等。

由此可知, 光度准确度或吸光度误差AA ( 或ΔA) 是一个综合性的技术指标。要使用紫外可见分光光度计测得准确可靠的数据, 必须注重上述几个方面的影响。否则, 不可能得到准确可靠的数据。特别应该指出的是, 在给出吸光度误差AA (或ΔA) , 同时也给出透射比误差TA ( 或ΔT) 时, 二者不能相互矛盾。